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CRX基因的慢病毒载体LV-Rho-EGFP的构建         
CRX基因的慢病毒载体LV-Rho-EGFP的构建
作者:高玲 文章来源:中南大学湘雅二医院眼科 点击数:7313 更新时间:2008/1/7
CRX基因的慢病毒载体LV-Rho-EGFP的构建
高玲 周民稳 刘刚 卢光秀
【摘要】 目的 构建以视紫红质基因为启动子,以绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,以视锥-视杆细胞同源结构域基因(CRX)为目的基因的视网膜特异表达载体,为今后视网膜细胞特异的靶向基因转移,特别是为视网膜疾病的基因治疗提供工具。方法:通过PCR技术从先前研究构建的以CMW为启动子的载体pEGFP-C3/CRX中扩增出1789bpEGFP/CRX的DNA片段,并亚克隆至PMD18-T载体中,通过T载体取代LV-Rho-EGFP中EGFP片段。用PCR、酶切、测序的方法检测。结果:经酶切,基因测序验证,EGFP/CRX插入LV-Rho-EGFP质粒中。结论:成功构建好以视紫红质基因为启动子,以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,以视锥-视杆细胞同源结构域基因(CRX)为目的基因的视网膜特异表达载体。
【关键词】 CRX基因; 启动子; 视紫红质; 视网膜; 增强型绿色荧光蛋白
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